Fluo-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針，超級chun

— — Ca²⁺綠色熒光探針Fluo-3的升級版本

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Fluo-4 AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針，超級chun；Fluo-4, Acetoxymethyl Ester; 可見光激發波長Ca²⁺熒光探針；Fluo-3；Fluo-8, AM；Rhod-2, AM；CAS NO：273221-67-3；

Fluo-4是可見光激發波長Ca²⁺熒光探針Fluo-3的改良版本，通過將Fluo-3結構上的氯離子（Cl^-）替換為電子吸引力更強的氟離子（F^-），使得zui大激發波長往短波長偏移10nm左右。正由于這個波長更接近氬激光器的波長，則當使用氬激光器來激發探針Fluo-4，能夠得到更強的熒光強度，比Fluo-3強一倍。另外，Fluo-4的Ca²⁺親和力幾乎接近Fluo-3（Fluo-3: Kd=0.4μM、Fluo-4: Kd=0.36μM），因此，使用上幾乎同Fluo-3。Ca²⁺結合后的zui大激發波長為494nm，zui大發射波長為516nm。可通過激光共聚焦顯微鏡或流式細胞儀來檢測胞內鈣離子水平的變化。Fluo-4, AM是Fluo-4的一種乙酰甲酯衍生物，具有細胞膜滲透性，只需簡單培養，即可輕易進入細胞。一旦進入細胞內，即被其內酯酶剪切生成不具膜滲透性的Fluo-4，從而滯留在胞內以發揮相應生理功能。

Fluo-4, AM相比較于Fluo-3的優勢：

1. 激發和發射波長往短波長偏移10nm，更接近氬激光器的波長，。因此，當使用488nm進行熒光激發，得到更強的熒光信號，比Fluo-3強一倍。
2. 50μg小包裝供應，使用方便，且能很好保證產品的穩定性。

Fluo-4, AM的應用圖片：

Fig. 1, U2OS cells were seeded overnight at 40,000 cells per 100 µL per well in a 96-well black wall/clear bottom costar plate. The growth medium was removed, and the cells were incubated with 100 µl of 4 µM Fluo-3, AM or Fluo-4, AM in HHBS at 37 °C, 5% CO₂incubator for 1 hour. The cells were washed twice with 200 µl HHBS, then imaged with a fluorescence microscope using FITC channel.

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Fluo-4, AM 鈣離子熒光探針與細胞染色

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