Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提
簡要描述：
Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提，一種源于粘質(zhì)沙lei氏菌（Serratia Marcescen，又稱為靈桿菌）的非特異性核酸內(nèi)切酶，由兩個*一樣的亞基構(gòu)成，每個亞基大約30kDa，含有245個氨基酸和兩個必需的二硫鍵。可以切割和降解各種形式的DNA和RNA（單鏈，雙鏈，線性，環(huán)狀，或超螺旋形式），生成含有5’-磷酸末端的3-5個寡核苷酸殘基片段，并且在很多種操作條件下有效。
產(chǎn)品時間：2024-03-26
打印當前頁 Benzonase Nuclease 全能核酸酶/廣譜核酸酶
（酵母重組表達，無細菌內(nèi)毒素殘留，無蛋白酶污染）
產(chǎn)品關(guān)鍵詞：
Benzonase Nuclease 全能核酸酶（廣譜核酸酶）；粘質(zhì)沙lei氏菌（Serratia Marcescen）；非特異性核酸內(nèi)切酶；RIPA裂解液；DNA/RNA降解；CAS：9025-65-4；
基本描述：
Benzonase，中文名全能核酸酶，或廣譜核酸酶，一種源于粘質(zhì)沙lei氏菌（Serratia Marcescen，又稱為靈桿菌）的非特異性核酸內(nèi)切酶，由兩個*一樣的亞基構(gòu)成，每個亞基大約30kDa，含有245個氨基酸和兩個必需的二硫鍵。可以切割和降解各種形式的DNA和RNA（單鏈，雙鏈，線性，環(huán)狀，或超螺旋形式），生成含有5’-磷酸末端的3-5個寡核苷酸殘基片段，并且在很多種操作條件下有效。對核酸堿基序列無特異性要求，可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進行切割，廣泛用于去除生物制品中的核酸。
主要應(yīng)用：
1、科研研究中，作為培養(yǎng)細胞上清和細胞裂解液去粘度的*酶制劑，去除核酸干擾提高后續(xù)蛋白純化或功能研究；
需求背景：進行重組蛋白純化或者天然蛋白提取研究中，*步就需要用細胞/組織裂解液如RIPA對其進行裂解釋放蛋白，此時往往伴隨著大量的基因組DNA被釋放出來，很多并不是獨立存在的，往往與核蛋白以復合物的形式存在，導致提取物非常粘稠，呈鼻涕狀。蛋白提取過程中若不能很好處理這些粘稠基因組，會造成蛋白提取效率的降低極核蛋白的丟失。傳統(tǒng)方法有采用超聲處理，DNase/RNase消化來降低或消除核酸影響，但由于操作的非標準化，通常難以評估此核酸清除步驟的有效性和數(shù)據(jù)穩(wěn)定性。
此時，若在加裂解液的同時加入一定量的Benzonase Nuclease全能核酸酶（廣譜核酸酶），可以很好的清除粗提物中的核酸，有效降低粘度【見圖1】，提高后續(xù)操作的效率。
圖1、細胞裂解液經(jīng)Benonase處理和未處理的比較圖。左管是僅加RIPA裂解液所得的離心產(chǎn)物，可看到鼻涕狀粘稠物懸浮在管中；右管事加RIPA裂解液和Benonase共同處理所得的離心產(chǎn)物，可看到上清非常透明。
2、用在生化分析樣品制備— — ELISA、色譜分析、雙相電泳和足跡分析等過程，使用本品benonase處理含有核酸的蛋白樣品，可提高分辨率，以及提高回收率。
3、疫苗工業(yè)、蛋白和多糖類制藥工業(yè)，去除宿主核酸殘留，使得疫苗和蛋白類核酸污染顯著降低至皮克級別，提供生物功效。
4、防止細胞凝聚（Cell clumping），特別是融化凍存的細胞樣品時；
應(yīng)用優(yōu)勢：Benonase不僅無蛋白酶活性，而且不會對健康細胞的生長造成干擾。
應(yīng)用背景：全血來源的外周血單個核細胞（PBMCs）在疫苗研究中具有重要的應(yīng)用價值，比如，定量疫苗誘導的T細胞反應(yīng)。T細胞反應(yīng)實驗zui初要求新鮮分離的細胞從而達到zui加的檢測信號，這給大規(guī)模的實驗中對樣本處理提出嚴格的操作限制。然而，凍存PBMCs（尤其是從凍存血液中分離出的PBMCs）一旦融化非常容易聚集到一起，影響后續(xù)的分析。
應(yīng)用示例：Smith JG et al.研究顯示Benonase（≥50 U/ml）加入PBMC融化緩沖液中有效預防細胞凝聚，從而使得PBMC冷凍保存的應(yīng)用成為可能。【文獻來源：Smith JG et al.Development and validation of a gamma interferon ELISPOT assay for quantitation of cellular immune responses to varicella-zoster virus. Clin Diagn Lab Immunol. 2001 Sep;8(5):871-9.】
Fig. 2. Comparison of results with frozen PBMCs isolated from freshly collected blood versus blood stored overnight (4°C). SFC represent the adjusted VZV ELISPOT response, i.e., the mean response to VZV antigen for replicate wells minus the mean response to MRC-5 control antigen for replicate wells.
產(chǎn)品優(yōu)勢：
1、酵母重組表達，無細菌內(nèi)毒素殘留。【大部分商業(yè)化的Benonase都是大腸桿菌重組表達，由于自身菌株特性，不管純化方法如何，或多或少都會受細菌內(nèi)毒素影響。】
2、無蛋白酶殘留，不會對蛋白本身造成干擾，影響測試結(jié)果準確性。
3、比活力高≥1.0×106U/mg蛋白【活性單位定義：在37℃，pH8.0反應(yīng)條件，2.625ml反應(yīng)體系中，30min內(nèi)使△A260吸收值變化1.0（相當于*消化37μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸）所用的酶量定義為一個活性單位（U）】
4、提供兩種純度的產(chǎn)品：≥ 90%（SDS-PAGE），以及≥ 99%（SDS-PAGE），前者滿足zui基本的科研應(yīng)用，價格更經(jīng)濟實惠；后者滿足生物制品要求。
5、酶活性值：≥250 U/μL。對于小體積制備物，可用稀釋緩沖液20mM Tris-Cl pH8.0, 2mM MgCl2, 2mM NaCl稀釋到一定濃度，再加入體系中。稀釋后溶液可4℃保存幾天維持穩(wěn)定。
6、液體酶形式提供，使用更方便。直接加入裂解液共同使用即可。
產(chǎn)品訂購：更大包裝或產(chǎn)品技術(shù)問題，請來電/在線咨詢，：。。
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | CAS NO. | 價格（元） | 貨期 |
| MP1509-25KU | Benzonase Nuclease 全能核酸酶 | 25KU | 9025-65-4 | 400 | 現(xiàn)貨 |
| MP1509-50KU | Benzonase Nuclease 全能核酸酶 | 50KU | 9025-65-4 | 720 | 現(xiàn)貨 |
| MP1509-100KU | Benzonase Nuclease 全能核酸酶 | 100KU | 9025-65-4 | 1380 | 現(xiàn)貨 |
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我司提供的Benzonase，比Merck、Sigma同等類型的產(chǎn)品性價比高很多，且基本有現(xiàn)貨，見下：
| 品牌/名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 濃度 | 價格（元） |
| Merck（Benzonase Nuclease,純度>90%，E. Coli） | 70746-3 | 10KU | 25 U/μL | 1670 |
| Merck（Benzonase Nuclease,純度>90%，E. Coli） | 71205-3 | 25KU | 250 U/μL | 2530 |
| Sigma（Benzonase Nuclease,純度>90%，E. Coli） | E1014 | 5KU | ≥250 U/μL | 643 |
| Sigma（Benzonase Nuclease,純度>90%，E. Coli） | E1014 | 25KU | ≥250 U/μL | 2254 |
【注】：Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
相關(guān)產(chǎn)品：更大包裝或產(chǎn)品技術(shù)問題，請來電/在線咨詢，：。。
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） | 貨期 |
| MP1501-100ML | RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液（強） | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
| MP1502-100ML | RIPA Lysis Buffer (Medium) RIPA裂解液（中） | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
| MP1503-100ML | RIPA Lysis Buffer (Weak) RIPA裂解液（弱） | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
| MP1504-100ML | Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液 | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
| MP1505-100ML | NP-40 Lysis Buffer NP-40裂解液 | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
| MP1506-100ML | SDS Lysis Buffer SDS裂解液 | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
常見問題（FAQs）： 詳見懋康內(nèi)容。
| 問1：在實驗的哪一步加入Benzonase全能核酸酶？ |
| 問2：如何稀釋Benzonase全能核酸酶？ |
| 問3：Benzonase全能核酸酶是否無蛋白酶活性？ |
| 問4：Benzonase全能核酸酶是否安全？ |
| 問5：為什么Benzonase全能核酸酶不工作？什么會抑制其活性？ |
| 問6：發(fā)現(xiàn)Benzonase全能核酸酶活性喪失，為什么？ |
| 問7：一不小心將Benzonase全能核酸酶置于工作臺上整周，是否能繼續(xù)使用？ |
| 問8：如何抑制Benzonase全能核酸酶活性？ |
| 問9：如何去除體系中的Benzonase全能核酸酶？ |
| 問10：Benzonase全能核酸酶與蛋白酶抑制劑cocktail兼容嗎？ |
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅能用作科研用途，不可他用。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提
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